游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒样品制备方案

　　原标题：游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒样品制备方案

　　游离脂肪酸（FFA），也被称为非酯化脂肪酸，不仅是脂肪水解的产物，也是脂肪合成的底物，在血浆中与白蛋白结合循环。血清中的FFA浓度与脂质代谢、碳水化合物代谢和内分泌功能有关。由于糖尿病、严重肝功能障碍、甲状腺功能亢进等疾病，FFA的浓度会增加。EZMeta™游离脂肪酸（FFA）比色测定试剂盒为血清、血浆、动植物组织、细胞和细菌中FFA的检测提供了方便的工具。其原理是FFA与铜离子结合形成可溶于氯仿的脂肪酸铜盐。通过测定铜离子的含量，可以计算出游离脂肪酸的含量，采用铜试剂法进行测定。

　　艾美捷 游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒：

　　编号：D-AKC2230

　　规格：48T / 96T

　　存储：储存在4°C下，避光，有效期为12个月

　　适用样品：血清、血浆、动植物组织、细胞和细菌。

　　游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒提供的材料和储存条件：

　　所需材料（但不包括在内）：

　　· 可以测量550 nm吸光度的微孔板阅读器或可见光分光光度计

　　· 培养箱、冰制机、冷藏离心机

　　· 96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液吸头

　　· 均质器（用于组织样品）

　　· 玻璃瓶（用于制备提取缓冲液）

　　· N-庚烷、无水甲醇、氯仿

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　　提取缓冲液：自行准备。取一个玻璃瓶，按照氯仿：N-庚烷：无水甲醇=28:21:1的比例制备提取缓冲液。将混合物密封存储在4°C，避光条件下。铜试剂：按照提供的方式直接使用。使用前使其平衡至室温。存储在4°C，避光条件下。显色剂：按照提供的方式直接使用。使用前使其平衡至室温。存储在4°C，避光条件下。标准品：在使用前加入1 mL提取缓冲液溶解。浓度为64 mM。该溶液可以密封存储在玻璃瓶中，4°C，避光条件下。标准曲线设置：根据下表将64 mM标准品用提取缓冲液稀释。

　　游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒样品制备：

　　注意：建议使用新鲜样品。如果不能立即进行测定，样品可以在-80°C下储存6个月。1.动物组织：称取0.1 g组织，加入1 mL提取缓冲液，在冰上均质。以4°C下8,000 rpm离心10分钟。使用上清液进行测定。2.植物组织：称取0.1 g组织，加入1 mL提取缓冲液并研磨。在冰上超声处理5分钟（功率20%或200 W，超声时间3秒，间隔时间7秒，重复30次）。以4°C下8,000 rpm离心10分钟。使用上清液进行测定。3.细胞或细菌：收集5×10^6个细胞或细菌放入离心管中，用冷PBS洗涤细胞或细菌，离心后弃去上清液；加入1 mL提取缓冲液，在冰上超声处理5分钟（功率20%或200 W，超声时间3秒，间隔时间7秒，重复30次）。以4°C下8,000 rpm离心10分钟。使用上清液进行测定。4.血清等液体样品：直接进行测试。

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